拍拍趣 - 婚礼片段0

收藏列表 (0) | 看过的节目 (0)

婚礼片段0

　　　　　　　　看下一个

与 婚礼片段0 不相关的其它视频

关于 冈崎片段 的百科小常识

冈崎片段（Okazaki fragment）：相对比较短的DNA链（大约1000核苷酸残基）是在DNA的滞后链的不连续合成期间生成的片段这是Reiji Okazaki在DNA合成实验中添加放射性的脱氧核苷酸前体观察到的。

DNA复制过程中 2条新生链都只能从5端向3端延伸前导链连续合成滞后链分段合成.这些分段合成的新生DNA片段称冈崎片段.细菌冈崎片段长度1000-2000核苷酸真核生物冈崎片段长度100-200核苷酸.在连续合成的前导链中 U-糖苷酶和AP内切酶也会在错配碱基U处切断前导链.

任何一种DNA聚合酶合成方向都是从5'向3'方向延伸而DNA模板链是反向平行的双链这样在一条链上 DNA合成方向和复制移动方向相同（前导链）而在另一条模板上却是相反的（后滞链）。那么在复制叉中新链是如何合成的呢？1968年冈崎（Okazaki）及其同事进行了一系列实验回答了这一问题。

他们做了两组实验一组是脉冲标记实验（pulse-labeling experiment）。以E.coli为材料在培养时培养基中加入同位素[3H]标记的dTTP 经30秒后 DNA刚开始复制分离DNA 然后在碱中沉淀变性让新合成的单链和模板链分开再用CsCl密度梯度离心以沉降的快慢来确定片段的大小再检测放射标记结果表明被3H标记的片段也就是新合成的片段沉淀系数为20S左右即都是长1000~2000Nt的DNA片段而亲本链要比它大20~50倍；第二组实验是脉冲追逐实验。目的是检测早期合成的DNA片段以后的命运又是如何的？是依然如旧的短片段还是连接成了长片段。这个实验是先进行标记培养30秒以后除去同位素继续培养几分钟再分离DNA在碱中沉淀检测结果。先合成的（带标记）的DNA不再是短片段而和总DNA的情况相似沉淀系数为70S~120S较长的片段这意味着刚开始合成的片段都是短片段以后再连接成长片段人们就把最初合成的短片段称为冈崎片段（Okazaki fragment）。

由于这个实验的结果使得人们普遍认为：无论是前导链还是后滞链都是先合成小片段然后在连成大片段称为“不连续复制“（discontinuous replication）。然而由模型预测应该只有一半放射标记存在于小片段中但实验的结果却全部是小片段DNA 为什么从前导链模板的3′-OH端延伸会不连续合成呢？人们在思考这个问题。1978年Olivera提出了半不连续（semidiscontinuous）复制模型也就是说前导链上的合成是连续的只有后滞链上的合成才是半连续的。现在已经弄清原来是由于细胞内都存在有dTTP和dUTP 而DNApolⅢ却并不能区分它们因此也会将dUTP加入到DNA中形成A·U对。那么在DNA中为什么没有U的存在呢？这是因为E.coli细胞里有双重“保险” 防止了U的“混入”。第一道关是细胞里的dUTPase 它能使dUTP变成dUMP dUMP是不能作为DNA合成的底物这样它就不再能加入DNA中。但总还有些漏网之“鱼” 它们还是逃过此关混入DNA中这就靠第二道关来清除“异己” 这道关的主角是尿嘧啶N-糖苷酶（uracil N-glycosylase）它可以切断混合尿苷的糖苷键形成无Pu和Py位点（apurinic or apyrimidinic AP）再由AP内切酶在AP位点切出一个缺口进一步进行切除修复。在细胞内尿嘧啶N-糖苷酶作用较快而AP酶作用较慢在新链合成之初约1200bp就有可能掺进一个U 但很快就被尿嘧啶N-糖苷酶切断糖苷键在AP酶未作用前在脉冲标记实验中就提取了用NaOH沉淀时 AP位点十分易断裂所以前导链也成了小片段。以下实验证实了这个解释：

(1)在dut-突变体（dUTPase缺失）中冈崎片段比在dut+中为短。这是因为U掺入机会增加；

(2)在ung-（尿嘧啶N-糖苷酶缺失）突变体中新合成的DNA约有一半由片段组成。这是(3)因为尿嘧啶N-糖苷酶缺失不会切除U的糖苷链也就不会出现AP位点所以碱沉淀时不易断裂从而保持了半不连续的原貌。

在dut- ung-双突变体中结果和实验（2）相同更进一步证实了此推测。

婚礼片段0 视频其他来源

视频名称: 婚礼片段0

视频标签: 司仪

视频描述: 0 一段婚礼视频集锦

发布时间: 2007-02-22 01:30:50

人　　气: 0

来源: 6rooms.com

6rooms.com

lalaq.com